蛋白表達服務介紹

hjc黄金城蛋白表達服務優點是實驗周期短、成本低、產量高。蛋白表達是指用模式生物如細菌、酵母、動物細胞或者植物細胞表達外源基因蛋白的一種分子生物學技術。在基因工程技術中占有核心地位。

重組蛋白表達與純化服務

主要方式：大腸杆菌表達係統、酵母表達係統、昆蟲細胞表達係統、哺乳動物細胞表達係統、植物細胞表達係統

主要表達係統介紹：

1、原核表達係統：將克隆化基因插入合適載體後導入大腸杆菌用於表達大量蛋白質的方法一般稱為原核表達。這種方法在蛋白純化、定位及功能分析等方麵都有應用。

    hjc黄金城科研人員建立了成熟的大腸杆菌表達及純化服務平台，提供包括各種重組蛋白以及其複合物在大腸杆菌中的表達與純化服務。

    服務項目：

    重組質粒構建；

    重組表達測試；

    可溶性表達條件測試；

    小規模蛋白表達和純化（2L培養基培養產物）；

    大規模蛋白表達和純化（10L以上）。 

原核表達一般程序：獲得目的基因=》準備表達載體=》將目的基因插入表達載體中（測序驗證）=》轉化表達宿主菌=》誘導靶蛋白的表達=》表達蛋白的分析=》擴增、純化、進一步檢測。

優點：原核蛋白表達係統既是最常用的表達係統，也是最經濟實惠的蛋白表達係統。原核蛋白表達係統以大腸杆菌表達係統為代表，具有遺傳背景清楚、成本低、表達量高和表達產物分離純化相對簡單等優點；

缺點：主要是蛋白質翻譯後缺乏加工機製，如二硫鍵的形成、蛋白糖基化和正確折疊，得到具有生物活性的蛋白的幾率較小。

2、酵母表達係統：酵母表達係統作為一種後起的外源蛋白表達係統，由於兼具原核以及真核表達係統的優點，正在基因工程領域中得到日益廣泛的應用，應用此係統可高水平表達蛋白，且具有翻譯後修飾功能，故被認可為一種表達大規模蛋白的強有力的工具。

    hjc黄金城科研人員建立了成熟的酵母表達純化服務平台，提供優質的重組蛋白在畢赤酵母和釀酒酵母中的表達與純化服務。

    服務項目：

    重組酵母表達質粒構建；

    重組質粒電轉化；

    重組表達子篩選；

    小規模蛋白表達和純化（2L培養基培養產物）；

    大規模蛋白表達和純化（10L以上）。 

優點：酵母蛋白表達係統以甲醇畢赤酵母為代表，具有表達量高，可誘導，糖基化機製接近高等真核生物，分泌蛋白易純化，易實現高密發酵等優點。

缺點：為部分蛋白產物易降解，表達量不可控。

3、哺乳動物細胞和昆蟲細胞表達係統：哺乳動物細胞表達外源重組蛋白可利用質粒轉染和病毒載體的感染。利用質粒轉染獲得穩定的轉染細胞需幾周甚至幾個月時間，而利用病毒表達係統則可快速感染細胞，在幾天內使外源基因整合到病毒載體中，尤其適用於從大量表達產物中檢測出目的蛋白。

優點：是蛋白翻譯後加工機製最接近體內的天然形式，最容易保留生物活性。

缺點：是表達量通常較低，穩定細胞係建立技術難度大，生產成本高。

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