哺乳動物細胞蛋白表達服務公司

哺乳動物細胞蛋白表達係統,具備蛋白折疊和翻譯後修飾的功能，使其蛋白更接近天然蛋白，從而獲得與天然蛋白相同的生物活性。因此使得哺乳動物細胞表達係統在重組蛋白藥物，特別是治療性重組單抗藥物的研發和生產中有最為廣泛的應用。

hjc黄金城生物醫藥所提供的哺乳動物蛋白表達係統基於無血清培養體係提供基因表達優化,瞬時表達,穩定表達及抗體生產等多種真核蛋白服務項目。哺乳動物細胞蛋白表達服務詳情

hjc黄金城科研人員建立了成熟的哺乳動物蛋白表達係統及純化服務平台，提供哺乳動物蛋白表達係統的表達與純化服務。擁有CHO、HEK293、BHK、 Vero等多種表達係統。

• 服務項目

• 貼壁及懸浮培養

• 瞬轉表達篩選

• 穩定細胞係建

Rabbit IgG expressed in transient transfected 293 cells

    Note: the condition medium was run in 10%SDS-PAGE gel and stained with coomassie blue（備注:）

    哺乳動物細胞表達係統的優勢在於能夠指導蛋白質的爭取折疊，提供複雜的N型糖基化等多種翻譯後加工功能，因而表達產物在分子結構、理化特性和生物學功能方麵最接近於天然的高等生物蛋白質分子。

哺乳動物細胞蛋白表達係統的分類

根據目的蛋白表達的時空差異，可將表達係統分為瞬時、穩定和誘導表達係統。
瞬時表達係統是指宿主細胞在導入表達載體後不經選擇培養，載體DNA隨細胞分裂而逐漸丟失，目的蛋白的表達時限短暫；瞬時表達係統的優點是簡潔，實驗周期短。大規模的瞬時表達技術是近年來的一個研究熱點。已有報道能放大到100L反應器中生產重組蛋白，產量（分泌型蛋白）可達1~10mg/L。不過該方法技術條件要求高，如質粒的純度、轉染的效率等。

穩定表達係統是指載體進入宿主細胞並經選擇培養，載體DNA穩定存在於細胞內，目的蛋白的表達持久、穩定。由於需抗性選擇甚至加壓擴增等步驟，穩定表達相對耗時耗力。
誘導表達係統是指目的基因的轉錄受外源小分子誘導後才得以開放。早期實驗常使用糖皮質激素、重金屬離子等誘導體係來調控基因表達，但存在特異性低和毒性高等諸多缺點；

表達係統的選擇

哺乳動物細胞表達係統中，重組蛋白的表達水平與許多因素相關，如轉錄和翻譯調控元件、RNA剪接過程、mRNA穩定性、基因在染色體上的整合位點、重組蛋白對細胞的毒性作用以及宿主細胞的遺傳特性等。選定表達係統之後，還需考慮表達載體與宿主細胞的合理搭配問題。因此如果需獲得一個基因的高表達。最好多試用幾種不同的載體及宿主細胞。

哺乳動物細胞蛋白表達係統應用領域

哺乳動物細胞表達係統已成為多種基因工程藥物的生產平台。

    哺乳動物細胞表達係統在新基因的發現、蛋白質的結構和功能研究中起了極為重要的作用。

    一、穩定表達細胞係的篩選

        1、構建目的基因的表達載體

        2、確定受體細胞

        3、確定篩選方法（抗生素的使用濃度）

        4、轉染後48小時，串帶鋪板（1:100），加篩選藥物

        5、3-4d換液一次，直至存活細胞長出島狀細胞株，越2周

        6、克隆耐藥細胞，檢測目基因的存在與表達。

    二、哺乳動物細胞表達係統

        （1）宿主細胞

        （2）表達載體的構建

        （3）表達細胞株的基因共壙增和篩選方法

        （4）可調控的哺乳動物細胞表達係統

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