哺乳動物細胞表達係統特點、優勢及研究現狀

哺乳動物蛋白表達係,具備蛋白折疊和翻譯後修飾的功能，使其蛋白更接近天然蛋白，從而獲得與天然蛋白相同的生物活性。因此使得哺乳動物細胞表達係統在重組蛋白藥物，特別是治療性重組單抗藥物的研發和生產中有最為廣泛的應用。

hjc黄金城哺乳動物表達係統服務內容  （了解服務詳情）

 亞克隆
 哺乳動物細胞瞬時表達

 轉染優化和表達檢測（從1L培養基）
 蛋白表達

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哺乳動物表達係統特點與優勢

按照宿主細胞的類型，可將基因表達係統大致分為原核、酵母、植物、昆蟲和哺乳動物細胞表達係統。與其它係統相比，哺乳動物細胞表達係統的優勢在於能夠指導蛋白質的正確折疊，提供複雜的N型糖基化和準確的O型糖基化等多種翻譯後加工功能，因而表達產物在分子結構、理化特性和生物學功能方麵最接近於天然的高等生物蛋白質分子。

哺乳動物細胞表達係統：克隆基因要在哺乳動物細胞中進行表達，必須先將基因重組到適當的真核表達載體中。重組的表達載體在大腸杆菌中進行擴增，並從大腸杆菌中提取和純化重組表達載體，然後將其導入哺乳動物細胞進行表達。在哺乳動物細胞中表達的基因，可以是基因組DNA，也可以是cDNA。 
編碼真核蛋白的外源基因在真核細胞中表達時，表達產物對細胞本身的影響不大，蛋白質本身也很少被降解。因此真核表達載體的啟動子大多是可以持續表達的，無需誘導。在篩選出轉染細胞後，持續培養，便可在上清中得到表達產物。

哺乳動物表達係統應用領域：多種基因工程藥物的生產平台；在新基因的發現、蛋白質的結構和功能研究中亦起了極為重要的作用。

其他表達係統

1、昆蟲表達係統
昆蟲是高等真核生物，能進行翻譯後加工和修飾。昆蟲細胞常用於真核蛋白質的生產。其生長速度快，不需要CO2培養箱，易於懸浮培養，可用於大規模表達蛋白質。
杆狀病毒表達係統利用一種不依賴於輔助病毒的病毒，該病毒可在適於懸浮培養的昆蟲細胞中增殖至高滴度，能獲得大量的重組蛋白，大部分超量表達的蛋白質為可溶性蛋白。杆狀病毒對脊椎動物無感染性。
2、酵母表達係統
酵母菌是一種單細胞真核生物，能進行翻譯後加工和修飾。酵母菌在特定的培養基中生長迅速，與哺乳動物細胞相比，易於操作和價格便宜。酵母表達係統是大規模表達重組真核蛋白的理想工具。

哺乳動物表達係統研究現狀

①部分蛋白在哺乳動物細胞中的表達已從實驗室研究邁向生產或中試生產階段。        ②已有許多重要的蛋白及糖蛋白利用哺乳動物細胞係統表達和大量製備、生產。如人組織型血纖蛋白酶原激活因子、凝血因子Ⅷ、幹擾素、乙肝表麵抗原、紅血球生成激素、人生長激素、人抗凝血素Ⅲ，集落刺激因子等。有些產品已投入臨床應用或試用。         ③雖然經過多年努力，哺乳動物細胞表達係統的表達水平有大幅度增高，但從整個水平上看仍偏低，一般處在雜交瘤細胞單克隆抗體蛋白產率的下限，即1-30μg/l08細胞/24小時。有人認為其限速步驟可囂是在工程細胞中(對於重組蛋白來講，常是異源的)，重組蛋白的分泌效率較低。

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