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Drug discovery
藥物發現

酵母菌蛋白表達係統

酵母表達係統兼有原核和高等真核係統的優點，具備培養條件普通、生長速度快、成本相對較低、能進行蛋白翻譯後加工、易獲得可溶性活性重組蛋白等特點，被廣泛用於重組蛋白尤其是真核蛋白的生產製備。其中巴斯德畢赤酵母（Pichia pastoris）因其生長速度快、商業化表達載體豐富、可獲得高效的分泌表達等優點，使其成為酵母表達重組蛋白的優先選擇。
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服務項目
hjc黄金城科研人員建立了成熟的酵母表達純化服務平台，提供優質的重組蛋白在畢赤酵母中的表達與純化服務。


  • 酵母表達係統服務項目:
    重組酵母表達質粒構建；重組質粒電轉化；重組表達子篩選；小規模蛋白表達和純化（2L培養基培養產物）；大規模蛋白表達和純化（10L以上）。
項目步驟
步驟實驗內容實驗時間備注
1重組酵母表達質粒構建2 周可選擇不同載體；不同親和標簽；分泌或胞內表達
2重組質粒電轉化1周不同表達菌株可選， PCR 鑒定5-10個克隆
3重組表達子篩選3-4周5-10個克隆篩選， Zeocin抗生素濃度篩選重組子，結合Western blot 方法鑒定重組蛋白表達
4小規模蛋白表達和純化2-4周優化培養基，菌體密度，甲醇濃度，誘導時間等
5大規模蛋白表達和純化根據表達體積商定可選擇搖瓶或者發酵罐培養
備注
Remarks

您可根據實驗需求選擇上述任一實驗內容，或相關實驗內容的組合

純化時選用親和純化、離子柱純化、疏水填料純化和分子篩純化； 蛋白本身特性，表達係統的選擇會影響最終蛋白的純度和活性。

相關實驗室
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