hjc黄金城細胞毒性實驗服務

    上海hjc黄金城的生物部在體外生物學領域有豐富廣泛的經驗，通過酶水平測定、細胞水平測定、細胞生物學、生物化學、體外同位素測定、穩定細胞株建立、基因敲除、RNAi和MicroRNA技術等，提供一套完整的生物學服務。

    hjc黄金城細胞水平測定服務項目

    細胞毒性分析
細胞凋亡檢測分析
細胞遷移分析
細胞侵襲分析
HTRF 細胞水平檢測分析
免疫染色分析
免疫熒光分析(96/384 孔板)
報告基因分析(綠色熒光蛋白/熒光素酶)
放射性配體受體結合試驗
細胞攝取分析
基因敲除分析
MicroRNA過表達分析
MicroRNA 敲除分析
有關腺病毒/逆轉錄病毒/慢病毒 載體的應用分析
hjc黄金城建立了100多種細胞株用於細胞水平測定。
乳腺癌細胞
大腸癌細胞
白血病細胞
肝癌細胞
腎癌細胞
肺癌細胞
黑素瘤細胞
卵巢癌細胞
胰腺細胞
胃癌細胞

了解細胞毒性服務詳情

細胞毒性是化學物質(藥物)作用於細胞基本結構和/或生理過程，如細胞膜或細胞骨架結構，細胞的新陳代謝過程，細胞組分或產物的合成、降解或釋放，離子調控及細胞分裂等過程，導致細胞存活、增殖和/或功能的紊亂，所引發的不良反應。

細胞毒性按作用機製可分3種類型:
①基本細胞毒性，涉及一種或多種上述結構或功能的改變，作用於所有類型的細胞;
②選擇細胞毒性，存在於某些分化細胞上，主要通過化學物質的生物轉化，與特殊受體結合或特殊的攝入機製所引發；
③細胞特殊功能毒性，對細胞結構和功能損傷輕微，但對整個機體損傷非常嚴重。

細胞毒性實驗方案的確立在確定MTT法作為細胞毒性實驗的方法之後，我們對實驗中可能涉及的各個參數進行了摸索和優化。最初，由於一切都是未知，因此常常幾個參數一起調整，使得各個參數對結果的影 響不是很清楚，走了一些彎路。後期逐漸摸清了參數對結果影響的權重，實驗方案逐步確立。 
考慮的實驗參數有:細胞批次、細胞密度、孵育時間、加藥次數、MTT 量、MTT 孵育時 間、DMSO溶解時間(振蕩時間)等。

細胞毒性實驗方法穩定後的部分數據在細胞毒性實驗方案穩定之後，在各孔吸光度的標準差、變異係數和各孔抑製率的標準差都可以控製在很低的水平，表明該實驗方案是穩定的，具有良好的重現性。

細胞毒性實驗質量評價指標

對細胞毒性進行質量評價的指標初步定為以下七條：
1、OD平均值:反映複孔間OD值的平均水平，OD值越大，細胞數越多。 
2、複孔OD值間的標準差(STDEV):反映各複孔OD值之間的離散情況。標準差越大，說明複孔間不平行性越大，操作誤差越大。
3、OD值間的變異係數(CV):也是反映複孔間OD值離散情況的指標。由於OD值間的標準差(STDEV)的單位和OD的單位是一致的，不能體現離散的權重，因此引入變異係數(CV)。這一指標以百分比的形式表現OD 值的離散情況，形象、直觀。 

    4、存活率(%Viability):計算各藥物濃度下細胞的存活率可以反映細胞存活情況，該值越大，說明藥物的細胞毒性作用越小。 

    5、存活率的標準差(%STDEV):該值反映如以每個複孔均作為單獨的實驗,則同批的複孔可以看作數批實驗，此時存活率的分布情況。該指標越大，說明複孔間越不平行。

    6、存活率的變異係數(%CV):該指標反映各複孔間存活率的離散情況，該值越大，說明說明每一列細胞孔(即一係列稀釋單孔)間不平行性越大。 

7、半數致細胞毒性濃度:指對半數細胞產生 毒性作用所需濃度。該指標可用來反映實驗係統是否正常工作及評價未知藥物對細胞的毒性。

細胞毒性檢測方法

細胞毒性檢測主要是根據細胞膜通透性發生改變來進行的檢測，常用以下幾種方法：
MTT、XTT法：利用線粒體內部酶的活性，可以將特定的四唑鹽類進行轉化，然後通過酶標儀進行檢測
LDH的方法：通過檢測細胞培養上清中LDH的酶活性，來檢測細胞毒性

其它酶方法：如檢測上清中堿性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等

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