蛋白酶製劑檢測/酶活性分析測定

酶製劑檢測原理

酶製劑檢測應用酶對底物專一性的特點，采用高純度底物，專一檢測某種酶製劑對底物的降解，然後測定產物含量（分光光度計）。 
標準曲線：通過用其高純度的產物製作標準曲線，通過分光光度計的讀數查出對應的產物含量，然後計算酶活。

酶製劑是指從生物中提取的具有酶特性的一類物質，主要作用是催化食品加工過程中各種化學反應，改進食品加工方法。中國已批準的有木瓜蛋白酶、α—澱粉酶製劑、精製果膠酶、β—葡萄糖酶等6種。酶製劑來源於生物，一般地說較為安全，可按生產需要適量使用。檢測酶製劑產品質量常用的指標一般是酶活性，但也不是唯一的指標。
我們提供酶製劑方麵的檢測：包括酶活、常規指標（水分、粒度等）、衛生指標（菌落總數、大腸杆菌、沙門氏菌等）。

可檢測的酶製劑產品

hjc黄金城專業提供各種酶製劑的檢測服務：脂肪酶、木聚糖酶、歧化酶、纖維素酶、半纖維素酶、蛋白酶、β-葡聚糖酶、尿素酶、糖化酶、植酸酶、澱粉酶、果膠酶、木瓜蛋白酶、α—澱粉酶製劑、精製果膠酶、糖化酶、脂肪酶、角蛋白酶等。

蛋白質活性檢測

常規的蛋白質質量分析手段包括SDS-PAGE蛋白質電泳分析、內毒素檢測與控製、酶活性檢測（終點法及動力學曲線）、基於細胞的蛋白質活性分析等。 

酶製劑檢測相關標準

GB25594-2010  食品安全國家標準食品工業用酶製劑
NY/T722-2003  中華人民共和國農業行業標準　飼料用酶製劑通則　
QB1805.2一93  中華人民共和國輕工行業標準　工業用糖化酶製劑
GBT20370-2006  生物催化劑酶製劑分類導則
GB8275-2009  食品添加劑　α-澱粉酶製劑
GB274-87  食品添加劑固定化葡萄糖異構酶製劑
GB8276-2006  食品添加劑糖化酶製劑
QB1502-92  食品添加劑果膠酶製劑
GB20713-2006  食品添加劑a-乙酰乳酸脫羧酶製劑
QB1806一1993  洗滌劑用堿性蛋白酶製劑
NY/T722-2003  飼料用酶製劑通則
QB1805.2一93  工業用糖化酶製劑
QB1805.3-93  工業用蛋白酶製劑　
QB2525一2001  食品添加劑　α-葡萄糖轉苷酶　
QB/T1804一1993  工業酶製劑通用檢驗規則　和標誌、包裝、運輸、貯存
QB2526一2001  食品添加劑　真菌α-澱粉酶　
QB2583-2003  纖維素酶製劑　
QB/T2306一1997  耐高溫α一澱粉酶製劑　
DB33/T459—2003  飼料添加劑飼料用複合酶製劑　
QB/T1803一1993  工業酶製劑通用試驗方法　
GB/T18634一2002  飼用植酸酶活性的測定分光光度法　
GBT5522-2008  糧油檢驗糧食、油料的過氧化氫酶活動度的測定
GBT5523-2008  糧食、油料的脂肪酶活動度的測定
GBT5521-2008  穀物及其製品中α-澱粉酶活性的測定比色法
GBT21498－2008  大豆製品中胰蛋白酶抑製劑活性的測定
GB-T8622-1988  大豆製品中尿素酶活性測定方法
GBT5009.186-2003  乳酸菌飲料中脲酶的定性測定
GBT5413.31-1997 嬰幼兒配方食品和乳粉脲酶的定性檢驗
GBT5009.183-2003 植物蛋白飲料中脲酶的定性測定
GBT17811-2008 動物性蛋白質飼料胃蛋白酶消化率的測定過濾法
GB05009-171 保健食品中超氧化物歧化酶（SOD）活性測定
GB/T5521-89 穀物和穀物產品α-澱粉酶活性的測定比色法
GB/T9826-88 小麥粉破損澱粉測定法　α-澱粉酶法
GB/T18932.16-2003 蜂蜜中澱粉酶值的測定方法分光光度法
GB/T22252-2008 保健食品中輔酶Q10的測定
NY/T911-2004 飼料添加劑　beta-葡聚糖酶活力的測定　分光光度法　
NY/T912-2004 飼料添加劑　纖維素酶活力的測定　分光光度法　
SB/T10317-1999 蛋白酶活力測定法
SN/T0800.3-1999 進出口糧食、飼料粗蛋白質檢驗方法　
SN/T0800.4-1999 進出口糧食、飼料尿素酶活性測定方法　
CNCA∕CTS0016-2008 調味品、發酵製品生產企業要求
WST66-1996 全血膽堿酯酶活性的分光光度測定方法羥胺三氯化鐵法
WST67-1996 全血膽堿酯酶活性的分光光度測定方法硫代乙酰膽堿-聯硫代雙硝基苯甲酸法

酶活性檢測服務特點

• 更短的檢測周期-幫助客戶快速獲取精準檢測結果
• 更低的檢測費用-合理的收費體係降低客戶測試服務成本
• 更完善的檢測方案-為客戶提供檢測分析一站式服務
• 更優質的售後服務-幫助客戶解決服務後期技術疑問

常見的酶活性測定方法

通常酶製劑活性的檢測是采用實驗室分析手段來進行評價，它可以用來篩選優質酶製劑、確定複合酶製劑的最佳組方及確定產品的最佳添加量等，酶製劑實驗室評價技術是目前飼料廠家應用最為廣泛的一種方法。其操作相對簡單，檢測所用時間短，便於生產實踐應用。酶活測定結果雖不能完全反映酶的使用效果，但通過檢測至少可以避免使用劣質的酶製劑。目前測定酶製劑活性的方法主要有：
1、比色法
比色法是以反應生成有色化合物的顯色反應為基礎，通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法，根據原理不同可分為還原糖法和色原底物法。
2、黏度法
這種方法是根據酶能夠降低一定濃度的標準底物（控製pH值、溫度等條件）的黏度的能力來確定酶的活性。利用的底物主要有化學合成的底物和自然提取的底物。測定的酶的活性值是通過與同時測定的標準酶活性的比較，來確定酶的活性。該法可用於木聚糖酶、β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶等酶活測定。這種方法的特點是通過降低底物的粘度來反映酶的活性，這也正是酶在體內起作用的重要特征。該法雖然靈敏度較高，但重現性差，操作複雜費時，應用難於普及。
3、免疫學法
用於酶活性分析的免疫學法包括ELISA法和免疫凝膠擴散法。這兩種方法是根據酶與抗體之間發生反應，然後ELISA法通過第二步反應，凝膠擴散法則通過印染過程來確定酶的活性。
這些方法非常靈敏，能夠檢測到極低水平的酶蛋白。但它們的缺點是對於每個產品的酶需要特殊的抗體，另外抗體能夠與非酶蛋白質發生反應。由於抗體本身所用的蛋白質是特定的，因此，由不同生產者生產的同種類型的酶之間是沒有交叉性的。另外，采用實驗動物的敏感性也值得探討。
4、凝膠擴散法
這種方法是將酶作用的底物與某種凝膠混合後倒入培養皿中，凝固之後，在凝膠上切開一條鑿，倒入標準酶液和測試酶液。培養一定時間後，在切開的凝膠周圍能夠看到水解區域，區域的大小與酶的含量成正比。在某些情況下，還可以再加入其他試劑來顯示水解的區域。如木聚糖酶活力的測定。
這種方法雖然簡單，但培養時間長。因為這種方法是根據區域的大小來確定酶的活性，所以其準確性要低於其他非擴散的方法。
5、比濁法
以酵母或酵母細胞壁在緩衝溶液中的濁度或吸光度的降低來表示酶活力，如β-葡聚糖酶活力的測定。
6、體外模擬消化技術
酶活測定畢竟不能反映外源酶在機體內真實的作用效果，因此，對於體外法評定飼料營養價值的研究不斷增加。體外法評定飼料營養價值是通過模擬消化道內溫度、pH、消化酶分泌、胃腸運動和養分吸收等參數，在體外建立一套與畜禽消化道內環境接近的操作程序，對飼料及酶製劑進行營養價值預測和評定。常用的體外模擬消化技術包括：①胃蛋白酶—胰酶法；②胃蛋白酶—小腸液法；③胃蛋白酶—胰酶—瘤胃液法；④胃蛋白酶—胰酶—碳水化合物酶法。