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Nanostring核心技術主要有以下關鍵步驟:
首先Nanostring設計了兩種類型的分子探針,一個是捕獲探針,一個是報告探針。
捕獲探針它是由於目標分子互補的序列組成的,報告探針會與目標分子的另外一端相應互補,並且帶有一個熒光編碼。當把要檢測的生物樣本準備好之後,與特定的探針結合,經過孵育之後就會與碳相應的目標分子進行雜交,這個過程很快就能完成。
為了去除沒有結合的探針和非特性的背景信號,會執行洗滌的步驟,僅保留下來雜交複合物。
Nanostring分析係統采用這個數字技術方法,每個雜交形成的複合物都被固定在片上不同的空間位置,然後通過數字掃描儀讀取報告探針上的熒光編碼,計算出每個特定的序列被檢測到的次數,這種數字技術避免了QPCR之類需要擴增的步驟從而大大減少了引入的偏差或者不確定的可能性。