【雲回顧】病理研究之細節決定TCR試驗的成敗

1、什麽是TCR？

組織交叉反應（Tissue Cross-Reactivity）是在體外檢測抗體藥物與組織上的抗原表位結合的試驗。目的是確認受試抗體與藥效靶組織抗原表位的結合，檢測抗體是否與非靶部位組織抗原結合，為確定非臨床安全性試驗相關動物種屬及預測毒性靶器官提供參考。

2、為什麽要做TCR？

抗體藥物具有免疫特性，除了與把抗原結合外，如果人體正常組織中存在相同或相似的抗原表位，還會與靶器官外的其他組織細胞結合從而產生嚴重的不良反應。

因此，進行TCR試驗是抗體藥物臨床前安全性評價的重要組成部分，對於抗體藥物的研發至關重要，也是國內外監管機構的要求。

3、TCR試驗的核心技術是？

免疫組織化學技術（IHC，immunohistochemistry）。采用冰凍或固定組織標本，切片，並用帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應對組織染色，對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項技術。

4、試驗所需的人體器官組織從哪裏來呢？

捐獻人體組織、手術取組織、胎盤組織、細胞係、商業化人體組織芯片。

5、如何正確的處理新鮮的組織？

將新鮮的組織進行冰凍，不建議使用化學固定法。

冰凍時要注意迅速冷凍，盡量避免緩凍或者反複凍融，會在組織中形成冰晶，破壞組織，也給後麵的試驗帶來觀察障礙。

6、如何判斷我的病理切片是否封閉好了？

利用抗轉鐵蛋白受體抗體對組織進行染色。若組織切片中的血細胞呈淡淡的黃褐色，那麽表明切片封閉好了。

7、組化染色時何時選擇一步法（直接法）？

一步法是將生物素標記與一抗偶聯，隻需要一步免疫組化反應便完成染色的方法。這種方法避免了二抗的非特異性染色，減少了幹擾。但是由於一抗與生物素的結合，很有可能會破壞了一抗的空間結構，尤其是抗體抗原結合位點，造成假陰性或假陽性。

8、TCR試驗當中經常會碰到的問題有哪些？

• 假陽性/假陰性

• 脫片

• 非特異性染色

• 邊緣效應

• “陰陽臉”

• 。。。

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