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免疫學檢測技術分析服務

›  免疫印跡
›  免疫共沉澱
›  ELISA
›  免疫組化
›  免疫熒光

hjc黄金城以抗體平台為核心建立了一係列相關的後續免疫學檢測平台，有ELISA,,WesternBlot等。
ELISA檢測的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由於酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用於測定抗原，也可用於測定抗體。

Western Blot是根據抗原抗體的特異性結合檢測複雜樣品中的某種蛋白的方法，用於檢測經電泳或斑點雜交後固定於膜上的蛋白質的檢測。特異、穩定的液態酶標抗體和相應的底 物，保證了快速、準確的檢測；而避免了放射性物質的使用，現已成為蛋白分析的一種常規技術，對蛋白進行定性和半定量分析。

免疫學檢測技術

一、抗原抗體反應
二、淋巴細胞的檢測技術
三、免疫學常用的分子生物學技術

1、抗原抗體反應

抗原抗體反應的特點：特異性、可逆性、階段性、可見現象；
抗原－抗體反應的分類：沉澱反應、凝集反應、免疫標記技術；
其中免疫標記技術是指用熒光素、酶及放射性同位素示蹤物質標記抗原(或抗體)進行抗原抗體反應，通過示蹤物質來檢測未知抗原或抗體的一種方法。該方法可提高靈敏度。對抗原或抗體進行定性或定量及定位。

2、淋巴細胞的功能測定技術

（一）淋巴細胞的分離：
  ①外周血單個核細胞分離
  ②淋巴細胞亞群的分離及鑒定（表麵標誌選擇性、純化淋巴細胞亞群）

（二）淋巴細胞的功能測定技術
體外法：
    淋巴細胞增殖實試驗
    細胞毒試驗
    酶聯免疫斑點法（enzyme-linkedimmunospot, ELISPOT）
體內法： 
①OT試驗(細胞免疫）
②細胞因子檢測： 機體的免疫細胞(如淋巴細胞、單核巨噬細胞)及非免疫細胞能產生不同種類的細胞因子，它們在免疫應答中起調控作用。細胞因子檢測是判斷機體免疫功能的重要指標，對某些疾病的診斷、病程觀察、預後判斷等是十分必要的。

檢測方法：
a.生物學活性檢測(Bioassay)：依賴細胞株增殖法/靶細胞殺傷法/細胞病變抑製法/細胞因子誘導產物分析法
b.免疫學檢測法：因為細胞因子具有抗原性，所以可以應用抗原-抗體反應來定量檢測；ELISA：應用細胞因子的單克隆抗體和多克隆抗體；ELISPOT：Enzyme-linked immunospot assay,酶聯免疫斑點試驗；流式細胞儀
c.分子生物學檢測法：應用細胞因子的探針進行檢測
d.生物芯片檢測

3、免疫學常用的分子生物學方法

①免疫印跡：高分辯率的凝膠電流與免疫化學分析技術相結合雜交技術，具有凝膠電流分析的容量大高分辨率和免疫化學分析的敏感度高、特異性強等優點。免疫印跡技術用來檢測蛋白質特性、表達及分布的最常用的方法。

②免疫PCR：抗原與抗體反應與 PCR 技術相結合的一種新技術，原理同 ELISA，不同的是 PCR 的放大係統取代了酶標記的放大效應，此方法可測量微量抗原或抗體。

免疫檢測技術的應用

免疫檢測技術以廣泛應用於生物科學的各個領域。
1.免疫疾病診斷
用免疫血清學方法對人和動物傳染病、寄生蟲病、腫瘤、自身免疫病和變態反應疾病進行診斷，是免疫技術最突出的應用。尤其是酶標抗體技術，已成為多種傳染病的常規診斷方法，如已有的人各型肝炎、豬瘟等 ELISA 試劑盒，它們簡便、快速，又具有高度的敏感性和可重複性。

2.動物植物生理活動研究
動植物中存在一些如激素、維生素等活性物質，它們在體內含量極微少，但在調節機體的生理活動中起重要作用，因此通過分析測定這些生物活性物質的含量及變化來研究機體的各種生理功能（如生長生殖等）。由於這些物質含量極低，用常規化驗方法難以準確測出。目前放射免疫測定和酶免技術已能精確測出 ng(10 -9 g) 及 pg(10 -12 g) 水平的物質，它們已成為測定動物、植物、昆蟲中微量激素及其它活性物質，研究動物、植物生理和生物防治的重要手段。

3.物種及微生物鑒定
各種生物之間的差異都可表現在抗原性不同，物種種源越遠，抗原性差異越大，因此可用區分抗原性的血清學反應進行物種鑒定、物種的分類等工作。血清學反應在細菌、病原菌等微生物鑒定和血清型及亞型的分析方麵已得到廣泛應用。但對動物種源，植物和昆蟲分類方麵還是一個新的領域。

4.動物、植物性狀的免疫標記
通過分析動物、植物的一些優良性狀（如高產、優質、抗逆性等）的特異性抗原，然後用血清學方法進行標記選擇育種，這是一個很有前途的方向，它比分子遺傳學標記選擇育種簡便。

5.免疫增強藥物和疫苗的研究
疫苗研究中需用血清學反應和細胞免疫技術測定免疫的效果。在研究一些免疫增強藥物，尤其研究腫瘤藥物時，需用細胞免疫技術分析測定它們對機體細胞免疫功能的增強作用。因為細胞免疫是機體抗腫瘤、抗病毒的一個重要機製。

6.發病機理研究
傳染病的病原從機體特定部位感染，並在特定組織細胞內增殖，引起發病。一熒光抗體感染或免疫酶組化染色，可在細胞水平上確定發病等病原微生物的感染細胞，還可用於研究自身免疫病和變態反應性疾病的發病機理，如免疫複合物的沉積部位的分析。

7.分子生物學研究

在基因工程的分離、克隆的篩選，表達產物的定性與定量分析，表達產物的純化等均涉及到免疫技術。如通常用免疫沉澱方法分離 mRNA 基因，酶標抗體核酸探針（地高辛核酸探針）檢測篩選克隆，免疫轉印技術分析表達產物的分子量、 ELISA 或 RIA 分析表達量、免疫親和層析純化表達產物，免疫方法分析表達產物的性質如免疫原性。免疫技術已是分子生物學研究中必不可少的工具。

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