美問必答 | 關於體外生物的等效性試驗在新藥研發中的作用

2023年8月，歐洲製藥科學聯合會（EUFEPS）和美國製藥科學家協會（AAPS）成功舉辦了第五屆全球生物等效性協調倡議（GBHI）會議，將世界各地的專業人士聚集一堂。本次會議針對推動全球生物等效性評估標準的協調進行深入的探討，其中全麵討論了體外測試作為臨床療效研究替代方案的適當性和潛在益處，逐步朝著統一的生物等效性評估標準邁進。會議希望找到一種最佳的協調策略，以提高不同機構之間的一致批準率，最大限度地減少與過去批準的產品的不一致，同時降低消費者風險。

生物等效性（BE）試驗對於新藥研發具有重要意義，BE試驗是通過研究生物利用度的方式，以藥代動力學參數為指標，在相同的試驗條件下比較同一種藥物的不同劑型，評估其活性成分在人體中的吸收程度和速度是否存在統計學上的差異。在新藥研發過程中體外BE試驗的作用體現在以下幾個方麵：

以藥代動力學作為指標，了解藥物在體外環境的釋放動力學，以此確保藥物在患者體內達到穩定血藥濃度的關鍵因素；幫助科研人員更好地了解藥物在不同製劑中的釋放速度，有助於製定更精準的給藥方案，提高藥物治療的可控性和效果。

針對部分藥物，比如磷結合劑或膽汁酸結合劑等，可采用體外研究如結合平衡試驗和結合動力學試驗作為有效性評價的方法，以代替傳統的藥代動力學為終點的人體生物等效性研究。

在藥物設計方麵，通過模擬體外環境，研究者可以觀察到藥物的釋放速度、吸收特性以及可能的代謝途徑，為藥物設計和優化提供有力支持。可以設計出更為高效和便利的劑型，提高患者的依從性。

通過在早期階段進行體外BE試驗，可以更早地發現潛在的問題，減少進入臨床試驗階段的失敗風險，節約時間和成本。

在多年的研究服務中，hjc黄金城CMC部門搭建了“固體製劑和液體製劑評價平台”、“眼科評價平台“、“吸入製劑評價平台”、“外用製劑評價平台”和“體外BE評價平台”。對於在胃腸道產生局部作用且無法進行體內等效性評價的藥物如碳酸司維拉姆片、硫糖鋁混懸液等，hjc黄金城也擁有豐富的體外生物等效性評價經驗。hjc黄金城雲講堂特邀製劑部項目經理黃曉玉做客，為大家分享胃腸道藥物體外BE項目的研究經驗。以下為大家整理了直播中的對於體外BE實驗的相關提問，希望能夠幫助大家進一步了解和解答生物等效性實驗的相關困惑。

歡迎點擊直播鏈接，回顧黃曉玉老師的整場分享。

問：參考FDA的指南，如何理解考來烯胺（消膽胺）FDA指南中結合動力學的研究，它用的0.3和3mM的膽汁酸鹽且裏麵都有0.1M的氯化鈉？

答：這一部分是FDA指南中對於考來烯胺結合動力學的操作要求，那麽，我們在試驗中是需要遵循FDA指南的步驟。對於這一塊個人的理解是這樣的：結合動力學的試驗是在模擬人體生理條件下進行的，正常人體當中膽汁酸鹽的濃度是在0.3-3克/每升的範圍,指南中的做法是分別按照最低的濃度和最高的濃度的膽汁酸鹽下進行的。

因為消膽胺是屬於高分子的季銨鹽類型的離子交換樹脂，作用部位在胃腸道，其他陰離子的存在可能會競爭性的影響消膽胺結合膽汁酸鹽的結果。使用0.1M氯化鈉是考察模擬人體生理濃度（正常人體氯離子電解質的濃度約為0.1M所以這也是對應了指南中氯化鈉的濃度是0.1M）下，消膽胺在不同時間結合不同濃度膽汁酸鹽的結合情況。

那麽為什麽會考慮是氯離子而不是其他比如說磷酸根離子等等，該方法既已是FDA指南的要求，推測肯定也是在經過一些考察與其他陰離子影響程度的大小對比過之後才定會下。

問：影響胃蛋白酶活性檢測的因素有哪些？

答：首先需要考慮所購買的酶的級別。其次需要考慮酶的濃度對於酶活力的影響。對於酶反應的速率以及酶濃度來說，在一定範圍內，當底物分子是足夠的時候，酶的量越多，底物的轉化速率越快。其他的影響因素是底物的濃度，pH值，除此之外檢測方法也會對結果有影響。

問：體外BE遞交資料是交到藥學資料的哪個模塊？

答：首先要說明，體外BE的資料不是在藥學資料模塊下遞交，體外BE的研究資料是屬於臨床2.7的模塊遞交，最終由CDE臨床模塊老師進行審核。這是我們和CDE的老師溝通後確認的。

需要遞交的資料目前沒有明確的文件要求，但是根據我的經驗至少需要以下幾個：試驗方法開發以及開發的報告和圖譜，各個pH值條件下方法學的驗證報告和圖譜，以及體外BE研究的方案報告和圖譜，另外NMPA發表的碳酸鑭咀嚼片生物等效性研究技術指導原則中，要求提供各個試驗中每個製劑單位的數據，以及統計學分析的結果。這些都是我認為至少需要必備的資料。

問：k1沒有用來計算90%CI置信區間，那k1的意義是什麽？

答：雖然90%的置信區間是通過k2的均值比計算的，k1沒有參與計算，但是根據FDA的指南，最終需要報告k1的結果值。我理解，k1是一個親和的常數，和結合中作用力的大小有關，並且他通過線性當做的斜率與截距的比獲得的。雖然沒有在90%的置信區間計算公式中，但是作為一個親和常數，他的結果值應該在一個相對固定的範圍內波動，並且這個值得大小和選擇可能與選擇的pH值的環境或試驗參數有很大相關性，即k1的結果可能對試驗條件的合理性有一定的指示作用。

問：請問體外BE要求至少幾條溶曲，一定要有區分力嗎？

答：從FDA個藥指南看，該類藥物的體外BE的研究並非都要求進行溶曲考察，目前可查到的個藥指南裏，醋酸鈣、碳酸鑭咀嚼片中有要求溶出研究，且該溶出研究是除了質量標準中規定的溶出方法（該方法用於穩定性和質量控製測定）之外，還需要提供的數據。FDA個藥指南中已給出了具體的溶曲方法參數要求，咱們隻需要按照這個要求去開展即可，不對是否有區分力做考慮。

關於體外BE相關的內容，您還有什麽困惑和感興趣的話題嗎？歡迎在文章最後留言評論，hjc黄金城願與醫藥同行常常互通有無，共同進步與發展。