全麵支持疫苗研發！hjc黄金城mRNA疫苗生物分析技術平台

2020-12-12

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hjc黄金城mRNA疫苗生物分析技術平台

2020年以來，新冠疫情席卷全球，伴隨著疫情的肆虐，新冠疫苗的研發和大規模應用成了全球的熱切期待，國內外多家醫藥公司紛紛投入到新冠疫苗的研發隊列中。11月16日，Moderna報道了其COVID-19疫苗中期的有效數據為94.5%，僅兩周多後的12 月 2 日，BioNtech 及其美國合作夥伴Pfizer公司披露消息，英國藥品監管部門已經緊急批準了其合作研發的 COVID-19 mRNA 疫苗 BNT162b2，這是曆史上第一個獲批的mRNA疫苗，據稱該疫苗可提供 90以上%的保護力。這兩款mRNA疫苗引起了業界廣泛關注，mRNA藥物研究也成了炙手可熱的領域。

hjc黄金城生物醫藥長期為各類新型生物技術藥及疫苗的安全性和有效性評價提供全方位支持，且也長期與加拿大Actuias等公司合作，致力於LNP-mRNA類藥物和疫苗的有效性及安全性評價分析工作，積累了豐富的經驗，建立健全了新型mRNA疫苗的相關生物分析技術平台。

mRNA疫苗將外源目的基因序列通過轉錄、合成等工藝製備的mRNA通過特定的遞送係統導入機體細胞，直接在體內表達目的蛋白，刺激機體產生特異性免疫學反應，從而使機體獲得免疫保護。

mRNA具有以下特點：

能導入細胞，在體內表達相應的抗原蛋白，避免了體外蛋白表達、純化過程；
能夠刺激免疫係統產生體液免疫和/或細胞免疫應答，發揮相應的免疫預防和/或免疫治療作用；
能夠通過刺激機體免疫係統產生多種細胞因子等方式增強機體免疫反應能力或改變免疫應答類型；
由於mRNA的降解是通過細胞正常代謝完成，降低了因感染或整合誘發基因突變的潛在風險，此類型疫苗具有其獨特的優勢。

mRNA疫苗

基於mRNA疫苗的作用機製和特點，hjc黄金城生物技術藥物分析部門為支持mRNA疫苗的安全性和有效性評價，建立了涵蓋代謝及生物分布，到總抗體、關鍵序列結構域抗體和抗病毒中和抗體效價，以及細胞免疫應答反應效力的係列評價技術平台。

mRNA水平生物分布分析

hjc黄金城擁有ABI7500係列Real-Time PCR擴增儀器以及配套的Kingfisher 核酸提取儀設備，可基於RNAase free管收集的Trizol保存的全血樣品以及其它類型的組織樣品通過後續的RT-qPCR技術進行mRNA的代謝與分布分析。

實時PCR檢測mRNA表達水平

△實時PCR檢測mRNA表達水平

mRNA表達蛋白抗原的生物分布分析

mRNA疫苗需要在體內翻譯成蛋白質後才能刺激機體進一步產生免疫應答，因此在蛋白層麵上確認mRNA的表達水平和分布尤為重要。

hjc黄金城生物藥分析部擁有多台Molecular Device M4係列酶標儀及新型iD5係列酶標儀，MSD係列電化學發光分析儀等支持多種類型的免疫分析方法，可以執行mRNA所翻譯蛋白抗原水平的不同靈敏度範圍的檢測和監測。

酶聯免疫分析(EIA)
熒光免疫分析(FIA)
時間分辨熒光（TRFIA）
熒光共振能量轉移（FRET）
化學發光（CLIA）
電化學發光（ECL）

試驗所用酶標儀及電化學發光分析儀

△試驗所用酶標儀及電化學發光分析儀

T細胞因子分泌水平評價

mRNA疫苗除引起B細胞體液免疫反應產生抗體外，也可刺激引起細胞的免疫反應，hjc黄金城生物技術藥物分析部門擁有MSD、luminex、FACS CBA等多個多重細胞因子分析平台提供節約樣本、節約成本模式的細胞因子分析技術支持，甚至ELISPOT單細胞層麵的細胞因子豐度變化分析。

MSD Multi Plex
Luminex Multiplex
FACS CBA

細胞因子豐度分析

△細胞因子豐度分析

多重細胞因子分析平台

△多重細胞因子分析平台

總抗體、關鍵結構域抗體效價分析

常規的B細胞分泌抗體效價評價主要基於間接ELISA的滴度檢測方法，hjc黄金城技術團隊核心成員早年致力於核酸及蛋白疫苗產品研究，獲得過相關專利，且在美國本土的pfizer公司接受過疫苗效價生物分析評價的係列培訓，基於實踐經驗建立了係列方法評價體係和標準製定規則，用於考察疫苗總抗體、關鍵結構域抗體效價以及評判它們的相關性。hjc黄金城生物技術藥物分析部門也可以基於MSD平台，利用經驗證試劑盒直接進行基於SARS-CoV-2五種不同的重要mRNA表達抗原SARS-CoV-1 Spike, SARS-CoV-2 N, SARS-CoV-2 S1 NTD, SARS-CoV-2 S1 RBD, and SARS-CoV-2 Spike的IgG、IgM、IGA檢測。